Heike Makatsch wurde am 13. August 1971 in Düsseldorf geboren. Ihr Vater, Rainer Makatsch, war Eishockey-Nationalspieler. Nach Aufnahme eines Soziologiestudiums fing sie 1993 als Moderatorin bei dem deutschen Musikfernsehsender VIVA an. Zwei Jahre später gab sie ihr Leinwanddebüt als naive Geliebte eines verurteilten Verbrechers in Detlev Bucks Komödie "Männerpension". Mit beachtenswerten Rollen in "Obsession" und "Liebe deine Nächste", Detlev Bucks satirischem Seitenhieb auf die Heilsarmee, machte sie sich als Schauspielerin bald einen Namen.

Nach einer Nebenrolle in dem gefeierten Zweite-Weltkrieg-Melodram "Aimée & Jaguar" überzeugte Makatsch Kritiker und Publikum gleichermaßen als Freundin des berühmten Autors Kurt Tucholsky in "Gripsholm". Danach war sie in Hauptrollen in Doris Dörries Drama "Nackt" sowie im Horrorfilm-Sequel "Anatomie 2" zu sehen, bei dem sie in die Fußstapfen von Franka Potente trat, die die Hauptrolle im ersten Teil der erfolgreichen deutschen Slasher-Reihe gespielt hatte.

Makatsch, die mehrere Jahre lang mit dem britischen Schauspieler Daniel Craig liiert und deshalb nach London gezogen war, tauchte auch in verschiedenen internationalen Produktionen auf, darunter "Late Night Shopping" (2001), "Resident Evil" (2002) und "Love... Actually" (2003). 2005 kehrte Heike Makatsch im großen Stil ins deutsche Kino zurück: Den Rock"n"Roll-Possen der Mockumentary "Keine Lieder über Liebe" folgte der Film "Almost Heaven", in dem Makatsch – die oft in ihren Filmen selbst singt – eine deutsche Countrysängerin spielt, die nach Nashville möchte, stattdessen aber schließlich in Jamaika landet.

Viel Kritikerlob erntete sie auch für ihre Titelrolle in der TV-Produktion "Margarete Steiff" über das Leben der berühmten Stofftier-Fabrikantin. Nach einer Hauptrolle als "ältere Schwester" in der Krise in Ed Herzogs hoch gelobtem Independent-Film "Schwesterherz" an der Seite von Anna Maria Mühe, ist Makatsch 2009 einmal mehr in der Verkörperung einer historischen Persönlichkeit zu sehen: In Kai Wessels "Hilde" gibt sie die legendäre Schauspielerin Hildegard Knef.